(一)外洋测定法
凭证不莱梅纤维研究所A.schcnck博士的研究效果,不莱梅苔黑素测定法为检测有黏性倾向且含糖集中的棉纤维提供了一种可靠的要领。 。。。它能将所有的糖划分出来,并和苔黑素形成有色络合物,使反映具有特异性。 。。。
1.测定原理
将苔黑素(3,5-二羟基甲苯)的浓硫酸溶液加到棉纤维的水萃取物中,可使低糖和多糖剖析成糠醛衍生物,和苔黑素天生显着的红色络合物,随着糖液中总糖含量的差别,天生络合物后溶液的颜色从柠檬黄到深红泛起出差别的颜色系列。 。。。通过和标准色卡较量,可检测萃取物中的含糖浓度。 。。。
2.测定方法
(1)配制试剂:将0.2g3,5-二羟基甲苯溶化在100g95%～97%的浓硫酸中,在10℃的冷藏条件下静置约一星期。 。。。
(2)测定要领:将制备好的1g棉纤维试验试样放入50mL的两次蒸馏水中,摇动15min。 。。。
为了加速测定速率,可用1根移液管将1mL溶液移入试管中,从一瓶制备好的苔黑素溶液中取2mL加入试管,轻轻摇动后即泛起显色反映(注重溶液会发热),10min后用一套标准色卡便可确定溶液的含糖浓度(目视)。 。。。若用完度计检测溶液颜色的透明度,须在有色的测定溶液中加入两次蒸馏水至25mL,将完度计设置在420nm波长,以水为比照,测定其透明度。 。。。
图显示出差别因素的糖形成了有区别的颜色透明度。 。。。这一要领特殊适用于定性测定,但也可接纳苔黑素法检测所有糖的因素。 。。。较量左图中的几条曲线,说明差别的糖会和同量苔黑素溶液形成差别的颜色深度。 。。。这种要领可通过颜色深度或完度值估算出棉纤维中蜜露的含量,若是想用该法定量测定州差别的糖分,必需使差别的糖分能顺遂地通过苔黑素磨练。 。。。
用不莱梅苔黑素法检测棉纤维上的蜜露时,若棉纤维上蜜露值凌驾或即是色标上的5时,则有黏性。 。。。 不莱梅苔黑素测定法属于全糖测定法。 。。。由于糖在剖析成糠醛衍生物时,要求的条件较量苛刻,因而该要领的普及性欠好。 。。。
(二)海内测定法
海内称不莱梅苔黑素测定法为定量法,是参照德国不莱梅的苔黑素试验法举行测定的要领。 。。。凭证GB/T16258—1996标准,此法是用3,5-二羟基甲苯—硫酸溶液作显色剂,使用分完完度计定量测定棉花含糖量的试验要领。 。。。
1.测定原理
在非离子外貌活性剂的作用下,使棉纤维上的糖溶于水中,糖在强酸性介质中转化为醛类,和3,5-二羟基甲苯爆发显色反映,天生橙黄色化合物,用分完完度计在425nm处和标准事情曲线较量定量。 。。。
2.试剂和质料
(1)蒸馏水(下面所有水指蒸馏水)。 。。。
(2)硫酸(浓度1.84g/mL)。 。。。
(3)3,5-二羟基甲苯。 。。。
3,5-二羟基甲苯—硫酸溶液:称取3,5-二羟基甲苯0.2g,置于100mL烧杯中,加入100g(约54mL)硫酸,搅拌使之所有溶化。 。。。现用现配。 。。。
(4)脂肪酸烷醇酰胺(尼纳尔,工业级)。 。。。
①测定用脂肪酸烷醇酰胺(0.04%)溶液:称取0.4g脂肪酸烷醇酰胺溶于1000mL水中,搅拌匀称。 。。。
②提取用脂肪酸烷醇酰胺(0.005%)溶液:量取测定用脂肪酸烷醇酰胺溶液100mL,溶于700mL水中,搅拌匀称。 。。。
(5)D-果糖。 。。。
①糖标准储备溶液:称取D-果糖0.200g,用水溶化后转入100mL容量瓶中,用水稀释至刻度。 。。。浓度为2.0mg/mL。 。。。
②糖标准事情溶液:用移液管吸收0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL糖标准储备溶液,划分注入50mL容量瓶中,用水稀释至刻度,该糖标准系列浓度划分为0１020mg/mL、0.040mg/mL、0.060mg/mL、0.080mg/mL、0.10mg/mL、0.12mg/mL、0.16mg/mL、0１20mg/mL。 。。。
3.主要仪器及用具
(1)分完完度计:波长200～800nm。 。。。
(2)天平:分度值0.01g、0.001g。 。。。
(3)振荡器:>200次/min。 。。。
(4)恒温水浴锅。 。。。
(5)250mL磨
4.试验样液妄想
(1)试验室样品:按GB6097—1985划定抽取实验室样品。 。。。
(2)试验样品:从实验室样品中随机抽取不少于15g的试验样品。 。。。
(3)试验试料:去除试验样品中粗大杂质,充分混淆(或用混样品),从中称取3份作为试料,每份试料重2.0g±0.1g。 。。。余样备用。 。。。
5.测定方法
(1)试样溶液的配制:取3份试料,划分置于250mL锥形瓶中。 。。。加入0.005%脂肪酸烷醇酰胺溶液200mL,在振荡器上振荡10min。 。。。用玻璃棒将棉花翻事后继续振荡10min,用定量滤纸过滤,获得3份试料溶液。 。。。
(2)空缺试验:吸收0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液1.0mL,注于25mL比色管中。 。。。将比色管置于70℃恒温水浴锅中,快速加入3,5-二羟基甲苯—硫酸溶液2.0mL,摇匀,继续置于水浴锅中40min,取出,加入0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液20mL,摇匀,冷却至室温,用0.04%脂肪酸烷醇酰胺溶液定容至刻度。 。。。将仪器调解好,在425nm波优点测定溶液的吸完值,纪录其读数,保存两位小数。 。。。
(3)事情曲线绘制:吸收糖标准事情溶液各1.0mL,注于25mL比色管中。 。。。重复方法(2)。 。。。
以吸完值为纵坐标、糖的标准事情溶液浓度(mg/mL)为横坐标绘制事情曲线。 。。。
6.效果盘算
用试料溶液的吸完值减去空缺溶液的吸完值,在事情曲线上查出试料溶液的浓度,按下式盘算糖的含量。 。。。
式中:X———试料含糖率;
c———在标准曲线上查得试料溶液中糖的浓度值,mg/mL;200———预处理试料时所加脂肪酸烷醇酰胺溶液量,mL;2×1000———试料重量,mg。 。。。
所得效果修约至两位小数。 。。。以三次试验效果的算术平均值作为该试料的平均含糖量。 。。。本要领适用于棉纤维所含全糖的定量测定,是测定棉纤维含糖较量准确的一种要领。 。。。
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